אנליזה של תאים חיים במיקרוסקופ בשיטה הותיקה נעשית ע"י גידול התאים על גבי מצע מתאים בבאריות, והעברתם לסלייד זכוכית על מנת להניח תחת עדשת המיקרוסקופ. מכיון שהליך זה מבולגן ולא יעיל, בחרתי הפעם לכתוב איך אפשר ליעל את התהליך ולבצע גידול של התאים וצביעה מבלי להעביר אותם ממקום למקום.לשם כך פותח סלייד מיוחד שנקרא - EZ slide. מעבדות מודרניות שעוסקות בתאים כבר התחדשו ועברו להשתמש בסליידים המחולקים לתאים על מנת לפסוח על העברת התאים מכלי הגידול לסליידים. סליידם מיוחדים אלה הינם נוחים במיוחד לאימונוציטוכימיה, כלומר לצביעה פלואורסנטית המסמנת את התאים ותת מבנים בתוך התא.ה EZ slide מאפשר לביולוגים לגדל את התאים, לקבע, לצבוע ולצפות בהם במיקרוסקופ מבלי להעביר אותם.אז איך זה עובד?מגדלים את התאים בתוך הבאריות שבסלייד בתוך המדיום המתאים ומוסיפים משרנים. יש אפשרות ל 4 או 8 באריות. מחליפים מדיום לפי הצורך לתוך הבאריות.שומרים את הסלייד עם התאים באינקובטור, ואפשר גם להניח את הסליידים אחד על גבי השני בצורה נוחה מכיון שיש בליטות בפינות המאפשרות זאת (ראו באיור).
ביום שבו רוצים לצבוע את התאים מסירים את המכסה העליון, מקבעים את התאים בעודם בתוך הבאריות, וצובעים בצביעה הרצויה. בכל בארית ניתן לצבוע צביעה שונה.בתום הצביעה מסירים את דפנות התא בקלות ללא חשש שהסלייד ישבר (מכיון שהחיבור לא נעשה עם דבק) ומבלי צורך בכלים מיוחדים (ראו באיור).ומכאן את הסלייד מעבירים לצפיה במיקרוסקופ להסתכלות נוחה ובטוחה.
תוני קיבולת של הבאריות בסלייד:Chamber capacity· Growing area per well: 4 well unit: 1.7cm2/ 8 well unit 0.7cm2· Media volume range: 4 well unit: 0.5-1.7ml / 8 well unit: 0.2-0.7mlהבאריות ודפנות הסלייד עשוי מפוליסטירן והסלייד עצמו מזכוכית וכן מגיע סטרילי ומוכן לשימוש.בנוסף המוצר נבדק ומתאים לעבודה בתאי גזע. בבדיקות גידלו תאי גזע עצביים מחולדה (rat neuronal stem cells) (NSC) על גבי EZ slide. לאחר אימות המולטיפוטנטיות של התאים לפי המורפולוגיה וצביעה במרקרים מתאימים (Nestin, Sox2), התאים שמרו על פוטנציאל ההתמינות שלהם וההוכחה לכך היתה בצביעה ע"י מרקר GFAP הצובע אסטרוציטים.
אשמח לעמוד לרשותכם
מירב גרבי
[email protected]
מחברת המאמר, מירב גרבי הינה בוגרת תואר ראשון בביולוגיה B.Sc. ותואר שני M.Sc. בביוכימיה מאוניברסיטת בר אילן.• למירב גרבי ניסיון של 3 שנים בעבודת מחקר במחלקה ל Cellular and Developmental Biology בביה"ס לרפואה New York, Mount Sinai School of Medicine • במסגרת עבודה זו חקרה את ההבדלים בין Fibroblast growth factors -FGFs לבין FGF homologous factors FHFs ע"י השריית מוטציה בחלבונים רקומביננטיים והכנה פרפרטיבית של החלבונים לאנליזה בקריסטלוגרפיה.• למירב מומחיות בשיטות: ביולוגיה מולקולרית, יצירת קונסטרקטים , RT-PCR, PCR טרנספקיות וטרנספורמציות, ביטוי חלבונים בחידקים, מיצוי חלבונים, טיהור חלבונים בקולונות אפיניות להפרין, ניקל וגלוטטיון, פתרון בעיות אגרגציה ופרסיפיטציה של חלבונים, אנליזת חלבונים בשיטת ווסטרן, צביעות קומסי וצביעות כסף של ג'לים, טרנספקציה לתרביות תאים, מבחני MTT לתרביות תאים ועוד.• מ - 2006- מנהלת את תחום מדעי החיים בחברת מרקורי לאחר שבמשך כעשור ניהלה גם את תחום הכרומטוגרפיה • מירב גרבי השתתפה בקורסים והשתלמויות בתחומים: כרומטוגרפיה, מיקרוסקופיה ומדעי החיים בחברת Merck .